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色谱柱使用前注意事项
点击次数:68 发布时间:2019-09-16
  色谱柱使用前注意事项:
 
  1、色谱柱内的存储液:
 
  色谱柱看的存储液,如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相,
 
  氨基(NH2)、氰基(CN)、硅胶柱(SiO2)均为正相条件–正己烷/异丙醇体系,反相柱(C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl)均为甲醇/水体系,检测前,请用相互溶的试剂将其替换;
 
  2、新色谱柱的平衡:
 
  新反相色谱柱:用纯甲醇冲洗色谱柱30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积,zui后用流动相稳定系统至基线平稳;
 
  新的正相色谱柱:用异丙醇0.5ml/min冲洗30个柱体积,再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳;
 
  3、流动相和样品保持洁净:
 
  由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板,各种试剂尽量使用色谱纯级的,用量少的试剂纯度至少是分析纯,水zui好是超纯水和全玻璃器皿双蒸水,使用前建议用0.45μm的滤膜过滤;样品溶液使用针筒过滤;
 
  样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的zui主要原因之一,复杂样品可选样品预处理柱(SPE柱)进行样品处理,如果不方便处理,zui好使用相匹配的保护柱,样品溶剂与流动相要相匹配,不能出现样品不互溶,极性相差太大等想象,否则会造成色谱峰形变差,鬼峰等现象,使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生;
 
  4、色谱柱允许使用的pH范围:
 
  每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围,请仔细对照你的色谱柱的使用pH范围,在pH范围以外使用,会使硅胶基质溶解或键合相水解,对色谱柱造成不可恢复的损伤,如果在临界pH处使用,分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。
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